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貓瘟病毒檢測卡的檢驗步驟和方法 貓瘟病毒檢測卡由預包被貓瘟病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成，應用酶聯免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿樣本中貓瘟病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經溫育后若樣品中含有貓瘟病毒抗體，則將與酶標板上抗原結合，經洗滌除去未結合的其他成分后. 再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶標記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產物變為黃色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有貓瘟病毒抗體。 貓瘟病毒檢測卡的檢驗步驟和方法： 1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。 2.取所需用量酶標板條，設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。 3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。 4.混勻，置37℃反應30分鐘。 5.扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。 6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。 7.洗滌，同步驟5。 8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。 9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。 |
